1.2试验方法
1.2.1菌悬液制备将大肠杆菌传代培养,取第3代营养琼脂培养基斜面新鲜培养物,用5 ml灭菌生理盐水将菌苔洗下,充分混混后制备成试验浓度的菌悬液。
1.2.2检样制备用灭菌生理盐水将实验菌液稀释
至103 ~103 cfu/ ml不同含菌量的菌悬液,以常规活菌计数法测定含菌量。将各纸巾检样分为A、B组,每种每组3份,在每份检样中滴染不同浓度菌悬液l ml,在无菌室内自然晾干,备用。
1.2.3检测方法①生理盐水稀释法:将B组染菌检样剪碎后加入到200 ml灭菌生理盐水中,充分混匀,制备成生理盐水样液。取样液1 ml接种无菌平皿,倒人冷却至45℃的熔化的营养琼脂培养基15~20 ml混合均匀。待琼脂凝固后翻转平皿置37℃培养48 h,观察结果,计数平板菌落数并计算出细菌总数。均质器处理法:将A组染菌检样剪碎后加入到200 ml 灭菌生理盐水中,用拍击式均质器拍打1 ~2 min,制备成生理盐水样液。按上述方法接种培养。③结果计算:要求每个平板上菌落数在30~300 cfu/平板之间,按以下公式计算结果:细菌总数=平板菌落数×稀释度。
2结果
统计分析结果表明,在检样含菌量高于103cfu/ g情况下,采用均质器处理法检测出细菌数比生理盐水稀释法检测更接近实际菌数,两种方法的检测结果有显著统计学意义(P<0.01)。随着检样中含菌量的增加,生理盐水稀释法的检测结果较实际含菌量明显偏低(表1)。